酸性蛋白酶測定試劑盒的操作方法

更新時間：2023-08-30

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酸性蛋白酶（ACP）是一種在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解的酶。該酶主要用于酒精發(fā)酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。酸性蛋白酶能夠在酸性條件下，催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸，酪氨酸在堿性條件下能夠還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)，產(chǎn)物在680nm處具有特征吸收峰，通過吸光值變化即可表征酸性蛋白酶的活性。

酸性蛋白酶測定試劑盒的使用步驟：

1、用Hanks液配制0.1%臺盼藍(lán)溶液；

2、用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液來消化培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞；

3、再加入適量Hanks液制成細(xì)胞懸液；

4、將待染色細(xì)胞稀釋至所需濃度；

5、每0.1ml細(xì)胞懸液約加新鮮配制的染液一小滴，室溫下染3—5min；

6、染色過的細(xì)胞材料，取一滴細(xì)胞懸液置玻片上，加蓋玻片后放高倍鏡下觀察；

7、死亡的細(xì)胞著淺藍(lán)色并膨大，無光澤。活細(xì)胞不著色并保持正常形態(tài)，有光澤；

8、計數(shù)1000個細(xì)胞中的活細(xì)胞和死細(xì)胞數(shù)目；

9、統(tǒng)計未染色細(xì)胞。可按公式計算出細(xì)胞活率。

酸性蛋白酶測定試劑盒的注意事項：

1、如儀器無本試劑盒要求的波長，請選擇接近的波長。