“社交悍匪"圖鑒

處理方法

“社交悍匪"來襲

     同學A：家人們誰懂啊，細胞比我先實現了"共同富裕"——培養基里面混進了不請自來的"室友"，顯微鏡下那突如其來密密麻麻的黑點到底是什么啊?!

      同學B：本來心情好好的，一打開培養箱，天塌了，還我清澈的培養基，那渾濁的液體是鬧哪樣啊?!

      同學C：這細胞咋開始變形了，也不愛增殖了，實驗還能不能開始了?!

     如果看到這些你也會產生共鳴的話，OK，沒錯，“社交悍匪"——各種菌類入侵你細胞平靜的生活了，細胞被動社交并接受“污染"這份令人感到bad的禮物，壞消息：細胞嘎了，好消息(自我安慰版)：意外的對照組出現了。

“社交悍匪"圖鑒

①細菌：入室搶-劫型社交

完-全不講武德，熱愛團建，全面入侵。

    ?污染速度：爆發性污染，通常24-48h就能看到明顯變化，培養基可見明顯渾濁，多伴有腥臭味；

     ?鏡下特征：黑色細沙狀/桿狀，小而密且分布相對規則的菌體，偶見菌體運動，細胞狀態變差，嚴重時漂浮死亡；

     ?處理：首先選擇滅菌丟棄。若細胞珍貴且污染程度輕可嘗試挽救。

     1）物理沖洗：貼壁細胞棄培養基，使用PBS潤洗細胞3-5次，每次10-20s，除去游離菌；

     2）高濃度抗生素沖擊：可先用20×雙抗浸泡細胞5min(若擔心損傷細胞，可以省略浸泡步驟)，再更換含有10×濃度雙抗的完-全培養基，將細胞放回培養箱培養12-24h；

     3）恢復正常培養：沖擊結束后，若污染有改善，恢復含1X雙抗的培養模式，無改善丟棄細胞。

圖1.細菌污染典型圖片(圖片源自客戶真實培養案例)

② 真菌：優雅社交

真菌比較有格調，來的不緊不慢，喜歡在培養基進行藝術創作。

?污染速度：早期培養基清亮無變化，一般3天左右可在液面、瓶壁或底部肉眼觀察到霉斑或者絮狀物。

酵母菌：白色/乳白色小顆粒或“酵母粉"樣沉淀，可形成黏液膜；

絲狀霉菌：白→綠→黑的“絨毛"“蜘蛛網"或絮狀菌落。

?鏡下特征：酵母型真菌污染物，卵圓形或短桿狀，常“出芽"形成典型“母子"或短鏈；霉菌污染鏡下可見細長、分支的菌絲縱橫穿插，菌絲呈絲狀、管狀、樹枝狀等。

?處理：首先選擇丟棄，并對環境進行消殺。貴重或不-可-再生株可嘗試早期搶救，隔離培養物，使用兩性霉素B/制霉菌素等藥物測試。

圖2.真菌污染典型圖片(圖片源自客戶真實培養案例)

③支原體：陰暗型社交

在看似正常的過程中悄然實施破壞大計。

?判別要點：細胞狀態突然變差，增殖緩慢，甚至形態改變，拉絲或漂浮生長，但培養基無變化，細胞間隙有時可看見不運動的黑點。

?鑒定方式：肉眼及鏡下均無法檢測到支原體的存在，必須借助試劑鑒定，推薦PCR法、顯色法、熒光染色法等相關檢測試劑盒。

?處理：較輕污染或珍貴細胞可用商用支原體清除劑嘗試挽救，一般周期2周左右，注意與其他培養物隔離，污染較重或清除劑無效立即棄掉且清除大環境。

圖3.支原體污染典型圖片(圖片源自客戶真實培養案例)

④黑膠蟲：薛定諤社交

身份撲朔迷離，出現后會像線面一樣繁殖。

?判別要點：培養基不渾濁，鏡下觀察，細胞周圍及培養液可見黑色的小點，原地打轉。隨著細培養時間的延長“小黑點"逐漸增多，更換培養液或洗滌細胞不能將其去除。細胞耗能明顯變快，但增殖較慢，狀態亦會變差，嚴重時死亡。

?處理：較輕污染且細胞狀態尚可時，使用黑膠蟲清除劑抑制污染，直至細胞狀態恢復，污染較重或清除劑無效立即棄掉且清除大環境。

如何阻止你的細胞“社交過度"？

無菌無菌無菌，重要的事情說三遍！！！

??不戴手套碰試劑，不換細胞間專用實驗服，更有big膽者炫水炫零食。

??槍頭倒吸不處理，還到處戳戳。

??高壓滅菌的衣服或試劑不烘干就放回細胞房。

??酒精時刻噴一切，噴手噴臺噴試劑。

??試劑分裝且單獨分配到人，不混用，不倒回。

??定期查崗：水浴鍋月月換新，培養箱水盤常關注，超凈臺濾網要更換，環境清潔勤安排，支原體檢測切勿忘。

致所有在細胞房奮斗的家人們：

我們養的不只是細胞，是耐心、是細心、是面對培養基異常時那顆強-大的心臟。

愿你的細胞永遠社恐，拒絕一切無效社交。

愿你的實驗永遠順利，數據漂亮到能發CNS